蛋白表达：

三羊开肽生物拥有国内成熟的抗原制备技术和先进的仪器设备，可为客户提供：
      （1）原核蛋白表达与纯化服务，通过全基因合成和亚克隆，构建表达载体，利用不同的表达菌株与纯化介质，最终获得具有一定纯度和浓度的高质量蛋白抗原；
      （2）多肽合成和载体蛋白（KLH/BSA/OVA）偶联服务。

服务特色：

1、提供多种表达载体和E. coli细胞，实现从基因到蛋白表达纯化的一站式解决方案，完成您的实验设计

2、技术成熟稳定、方法手段齐全。

3、服务周期短。

原核蛋白表达与纯化服务内容：
1、基因合成，

从基因中搜索目标蛋白的cDNA序列，根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化。 提供客户：合成设计好的基因序列及测序序列。

时间： 1~2周

2、载体构建（表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取。）

扩增并抽提构建好的表达质粒。

将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。

至少挑选数个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。

SDS-PAGE电泳检测菌株中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。

提供客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。

时间： 1~2周

3、摇瓶培养重组细菌，诱导表达目标蛋白。

对温度、时间、IPTG浓度等表达进行优化，诱导表达目标蛋白。

通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

利用蛋白酶去除不需要的纯化标签（Tag），再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。

三羊开肽生物科技有限公司会通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

提供客户：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达95%以上。

时间： 2~3周

4、大规模蛋白制备。

对蛋白生产工艺进行优化。按小试工艺放大生产规模，制备客户需要的合格蛋白产品。

提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。

时间：协商

5、蛋白复性服务。

利用不同复性缓冲液的体系，对目标蛋白进行小量复性试验提供复性后样品供客户检测。 可根据客户要求，按照其中一种样品的复性条件制备小量的复性蛋白。三羊开肽生物科技有限公司可提供具体的复性缓冲液配方及复性工艺。

其他：内毒素去除、除菌，冻干等进一步加工。

通过质谱分析等方法详细检测目标蛋白的质量。

提供客户：加工后的最终产品及相关实验和检测报告。

时间：1~2周

武汉三羊开肽生物科技有限公司---柳女士

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