随着蛋白质研究的不断发展，蛋白质分子量测定方法也在不断优化和创新。百泰派克生物科技在此为您介绍蛋白质分子量测定可尝试的 6 种有效方法，以提高测定的准确性、灵敏度和适用性，适应不同类型的蛋白质样本。

1、蛋白质分子量测定方法之质谱法（Mass Spectrometry, MS）

(1) MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱）

适用范围：

* 适用于小分子蛋白（一般 ≤100 kDa）。

• 适合纯化的蛋白或简单蛋白混合物。

优点：

* 高精度（误差<0、01%）

• 快速测定蛋白分子量
• 适用于单个蛋白质的分析

局限性：

* 对大蛋白（>100 kDa）或复杂样本解析能力较差

• 需要纯化的样品，杂质可能影响测定

(2) ESI-MS（电喷雾电离质谱）

适用范围：

* 适合测定大分子蛋白及蛋白复合物。

• 适用于原核和真核表达的蛋白。

优点：

* 适用于蛋白质复合物、翻译后修饰（PTMs）分析

• 分辨率高，可测多电荷分布

局限性：

* 需要优化去盐处理，以减少信号干扰

• 对于高度聚集或膜蛋白样本，离子化效率较低

2、蛋白质分子量测定方法之尺寸排阻色谱-多角度光散射法（SEC-MALS）

适用范围：

* 适合蛋白质复合体、聚集体和结构变化分析。

• 适用于非变性条件下的蛋白研究。

优点：

* 直接测定溶液中蛋白的真实分子量（误差<5%）

• 可区分不同构象或聚集状态的蛋白

局限性：

* 需要高纯度样品，避免非特异性结合导致测定偏差

• 适用于较大蛋白，小蛋白精度可能受限

3、蛋白质分子量测定方法之超速离心分析（Analytical Ultracentrifugation, AUC）

适用范围：

适用于蛋白质复合物、聚集状态和结合亲和力*分析。

• 可在生理条件下测定蛋白分子量。

优点：

* 提供溶液中蛋白的真实分子量，避免样品变性影响

• 适用于大分子蛋白、蛋白复合物及翻译后修饰蛋白

局限性：

* 实验时间较长，设备成本较高

• 需要优化实验条件（如 pH、离子强度等）

4、蛋白质分子量测定方法之SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）与 Western Blot

适用范围：

* 适用于常规蛋白分子量估算（误差 5%-10%）。

• 适合粗略判断蛋白的纯度。

优点：

* 操作简单，实验成本低

• 适用于检测不同样本的蛋白表达水平

局限性：

* 不能提供高精度分子量数据

• 变性条件下可能影响蛋白迁移率，导致误差

5、蛋白质分子量测定方法之纳米孔测序法（Nanopore-based Single Molecule Analysis）

适用范围：

• 适用于超高分辨率的蛋白质研究。

优点：

* 直接测定蛋白的大小和分子量，无需标记

• 适用于复杂样本或异质性蛋白混合物

局限性：

* 目前仍处于发展阶段，商用设备较少

• 需要优化纳米孔的大小和蛋白通过速度

6、蛋白质分子量测定方法之 X 射线小角散射（Small-Angle X-ray Scattering, SAXS）

适用范围：

* 适用于蛋白溶液中的结构和分子量测定。

• 适合无晶体结构蛋白的分析。

优点：

* 可测定蛋白的分子量及形态信息

• 不需要蛋白晶体，适用于结构研究

局限性：

* 需要高质量的样品制备

• 数据解析较复杂，精度受实验条件影响

结论：如何选择合适的方法？

随着蛋白质研究的深入，多种蛋白质分子量测定方法可互相结合，以获得更精准的数据。

• 如果关注高精度测定：建议使用质谱法（MALDI-TOF-MS 或 ESI-MS）。
• 如果需要研究蛋白复合体：SEC-MALS 和 AUC 是最佳选择。
• 如果样本较复杂，需无损测定：纳米孔测序法将是未来的趋势。
• 如果关注蛋白形态：SAXS 可提供额外结构信息。

结合多种蛋白质分子量测定方法，可有效提高蛋白质分子量测定的准确性，助力精准生物研究和生物医药开发。百泰派克生物科技致力于提供先进的蛋白质分析服务，包括蛋白质分子量测定可尝试的6种有效方法。我们结合质谱、光散射、超速离心、等电聚焦和尺寸排阻色谱的优势，为客户提供精准、高效的蛋白质分子量测定解决方案。我们的专业团队将根据您的需求，定制最佳的分析策略，助力您的研究与开发。欢迎与我们合作。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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